【PCR検査】自分でできる検査キットは使えるのか｜試薬の感度と特異度

2019-nCoVの検出に使われている試薬など

新型コロナウイルス（2019-nCoV）の遺伝子領域２か所、open reading flame 1a (ORF1a) および spike (S) を特異的に検出する 2-step RT-PCR 法、あるいは（註）TaqMan プローブ を用いたリアルタイム one-step RT-PCR 法による遺伝子検査により 2019-nCoV を同定する

 

2-step RT-PCR 法または one-step RT-PCRで検出を行う際に専用の試薬を用いる模様。

2-step RT-PCR 法による2019-nCoVの検出

試薬

SuperScript IV Reverse Transcriptase (RT) [Thermo, Cat.No. 18090010. 50, 200 または 類似品(PrimeScript RT reagent Kit, Takara RR037A 等)]、[Quick Taq HS Dymix Toyobo DTM-101 または類似品(PerfectShot Ex Taq, Takara RR005A 等)]、2019-nCoV 特異的プライマー、Oligo(dT)12–18 Primer (Thermo, 18418012 または類似品)、Random Hexamers (Thermo, N8080127、または類似品。特に指定はない)、Recombinant RNase Inhibitor (Takara-Bio, 2313A、または類似品)、PCR クリーンアップキット(Wizard SV Gel and PCR Clean-Up System, Promega A9281、または類似品)、DDW。

one-step RT-PCR法による2019-nCoVの検出

試薬

QuantiTect® Probe RT-PCR Kit (QIAGEN Cat#204443 等) [AgPath-ID One-step RT-PCR Reagents (Thermo Fisher Scientific Cat# AM1005 等)、TaqMan Fast Virus 1-Step Master Mix (Thermo Fisher Scientific Cat＃4,444,432等)、One Step PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time)(タカラバイオ Cat#RR064A 等)、One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix（タカラバイオ Cat#RR600A 等）、One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG（タカラバイオ Cat#RR601A 等）、THUNDERBIRD Probe One-step qRT-PCR Kit (東洋紡 Cat#QRZ-101 等)]のライトサイクラー、ABI